L'injection s'effectue sous la peau, on parle d'injection sous cutanée.

Il peut être utile, pour les premières injections, de demander à votre vétérinaire de tondre les poils de l'animal aux endroits correspondants aux sites d'injection. Ainsi la peau est bien visible afin d'assurer un bon passage de la peau lors de l'injection ; par inexpérience, il peut en effet arriver que les premières injections soient effectuées dans les poils, l'aiguille n'ayant pas traversée la peau.
Il est préférable de voir la peau de l'animal, il est alors recommandé de mouiller les poils avec un peu d'eau.

Il existe une technique particulière concernant la formation du pli de peau et l'orientation de l'aiguille afin de réaliser l'injection dans les meilleures conditions :

• Il faut soulever la peau en la maintenant entre le pouce et l'index afin de réaliser un pli en forme de pyramide.
• Ensuite, il faut maintenir l'aiguille parallèle au corps de l'animal et non perpendiculaire ; c'est à dire qu'il ne faut pas diriger l'aiguille vers le centre de l'animal, car dans ce cas, c'est une injection dans le muscle qui risque d'être effectuée (ce qui est inadapté à l'insuline utilisée).
• Il est recommandé de piquer la peau avec l'aiguille à la base du pli de peau. Il peut en effet arriver que l'aiguille traverse le pli de peau de part en part, la peau est alors franchie deux fois, le contenu de la seringue ne sera pas injecté dans la peau mais en dehors de l'animal. Le fait de piquer à la base du triangle évite ce problème. Par précaution, on relâche le pli de peau avant l'injection, le fait que le pli disparaisse montre que l'aiguille n'a pas traversé deux fois la peau.

Il est recommandé de tenir la seringue de telle façon qu'il ne soit pas nécessaire de modifier la position des doigts ou de la main entre le franchissement de la peau et l'injection du contenu de la seringue. La meilleure position à adopter est le maintien de la seringue entre l'index et le majeur, alors que le pouce est placé sur le piston, les doigts étant dans cette position lorsque l'aiguille passe la peau.
Certaines personnes dans un premier temps passent la peau, puis dans un deuxième temps repositionne leurs doigts pour pousser le piston. Lors du changement de position, l'aiguille peut bouger, ce qui risque de faire mal à l'animal.

L'injection doit être réalisée le plus rapidement et le plus calmement possible.
Le passage de la peau est susceptible de provoquer une douleur (les nerfs se situant à la surface de la peau), c'est donc cette étape qui doit être effectuée le plus rapidement et le plus fermement possible. Les aiguilles utilisées pour les injections d'insuline sont très fines, habituellement, ces injections ne sont pas douloureuses.
La pression exercée sur le piston afin d'injecter l'insuline doit être constante ; la vitesse d'injection ne doit pas être trop rapide au risque de sortir de la peau par un mouvement brusque, ni trop lente car la patience de nos animaux domestiques a ses limites.

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